1.1 材料微型月季“紅寶石”的當年生健壯無病蟲害嫩枝，帶腋芽。 999中國苗木網,www.cqhuayin.com

1.2 方法 苗木網,999miaomu.com

1.2.1 外植體處理將嫩枝剪成小段，每段帶一個腋芽，洗衣粉水震蕩清洗后，用流水沖洗。常規滅菌：0.1%升汞、20 min；2%次氯酸鈉、15min，后用無菌水清洗4次，轉入培養基中（MS + 6-BA 1 mg/L +NAA 0.1 mg/L (以下單位同)）。

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1.2.2 增殖培養將成活外植體萌發后，長至2 cm 左右高的腋芽切下，轉至增殖培養基中。根據瞿素萍等對切花月季的實驗[3]，MS 培養基誘導不定芽效果好，故本研究擬先采用MS 為基本培養基，調節6-BA 與NAA 濃度篩選微型月季“紅寶石”的最佳增殖培養基，不同培養基激素配比見表1。1.2.3 生根培養當增殖苗長至2~3 cm高時，分棵切開轉入生根培養基中。主要對基本培養基類型，激素種類和濃度進行篩選調節。不同培養基激素配比見表2。

1.2.4 培養條件MS，1/2MS 為基本培養基，瓊脂5.5 g/L，蔗糖30 g、pH 值為5.8，溫度（22±2）℃，光照強度2 000～3 000 lx，光照時間12 h/d。

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2 結果與分析 999中國苗木網,999miaomu.com

2.1 初代培養按 苗木網,999miaomu.com

1.2.1 中方法進行外植體滅菌后，將材料接種在初代培養基上（污染率和萌發率統計于表3），3 d 后觀察到污染現象，主要為細菌污染，污染率為35%。初代培養約10 d 后，腋芽開始萌動，萌發率為58 %，同時腋芽逐漸展開，葉片增多，3 周后即可進行增殖培養。 苗木網,www.cqhuayin.com

2.2 不同類型培養基對微型月季增殖的影響將腋芽萌發，且生長健壯的芽苗分棵切開接種到所列的培養基中，25 d 后統計增殖率并觀察增殖生長情況是，細胞分裂素和生長素配合使用對組培苗增殖率總體上看效果是比較好的。所設計的8 種培養基均能誘導出側芽，但均呈現一個趨勢，即NAA 濃度相同時，6-BA 濃度越高，反而不利于微型月季側芽的誘導，較高濃度的6-BA 抑制植株生長，出現腳葉發黃的現象，當6-BA 濃度為2 時，抑制作用就很明顯了。其中以3 號培養基：6-BA 1 +NAA 0.1 和4 號培養基6-BA 1.5 + NAA0.1 的濃度組合增殖效果較好，分別達100%和102%，且較早誘導出側芽。

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2.3 不同類型培養基對微型月季生根的影響不論在什么激素濃度下，1/2MS 基本培養基根誘導效果都好于MS，說明微型月季生根對基本培養基無機鹽敏感，無機鹽濃度是影響微型月季生根的關鍵因素之一。當將基本培養基各成分降至原來的二分之一時，對微型月季生根有較大改善，這一特點在其他木本植物如紅杉上也有發現[4-5]。同時在相同基本培養基中，不同激素種類和濃度的使用對微型月季的生根效果存在一定的差異。本試驗中所使用的IBA 和NAA 兩種激素均能誘導微型月季生根，但效果有差異，其根的誘導對IBA較敏感，并且在0.5 mg/L 的濃度時效果最好，生根率可達81 %，18 d 就開始有根突出了，生根植株根的數量也較均勻，都可達到6~9 條，27 d 左右就可達到移栽標準。

3 討論

(1) 本實驗主要是通過腋芽萌發來實現微型月季的植株再生，接種到初代培養基中，腋芽萌發的同時，我們還觀察到大部分外植體在莖段基部長出白色愈傷組織。由此，在以后的研究中我們還可以嘗試通過愈傷組織分化途徑來誘導植株再生，這一途徑在切花月季上已有較多成功的報道[6-7]，但在微型月季上還未見報道。由于愈傷組織分化芽比較容易發生體細胞無性系變異，這一方法不僅可以誘導植株再生，還能獲得一定數量的變異植株，我們可以從中發現并利用其中的優良性狀。

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(2) 月季組培苗增殖的主要方式為側芽增殖，即從葉腋處萌發出側芽以達到增殖的目的。理想的增殖率與激素種類、濃度和葉腋數有相互關系。在適宜的激素種類和濃度下，葉腋數量多的植株發出來的側芽數就多，但植株上部的葉腋處是不能萌發側芽的。所以在適宜的激素種類和濃度下，可以根據材料情況切割，保留一定數量的葉腋，以達到理想的增殖率。 999中國苗木網,999miaomu.com

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