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    (1)愈傷組織的誘導(dǎo)

    配制初代培養(yǎng)基：初代培養(yǎng)基的主要植物需要成分有大量元素、微量元素、有機(jī)成分、激素和蔗糖，準(zhǔn)確量取培養(yǎng)基的各成分，并充分混合成混合溶液；然后溶解瓊脂，待完全溶化后加入混合溶液、蒸餾水至刻度線，最后將培養(yǎng)基的pH值調(diào)至5.8。最適不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.5mg/LKT+0.5mg/L6-BA，不定芽增殖培養(yǎng)基為MS+1.5mg/LKT+0.05mg/L6-BA，不定根培養(yǎng)基為MS+0.3mg/LNAA。分裝培養(yǎng)基：分裝引流時(shí)要確保培養(yǎng)基不污染瓶口，分裝好的培養(yǎng)基做好記號(hào)放置于高壓滅菌鍋中滅菌，放置培養(yǎng)基時(shí)不要倒置以免培養(yǎng)基倒流出來(lái)。 999中國(guó)苗木網(wǎng),999miaomu.com

    (2)選擇

    露地栽培生長(zhǎng)健壯的幼齡小球?yàn)椴牧�，先在室�?nèi)消毒過(guò)的珍珠巖基質(zhì)中栽植30天，待新根長(zhǎng)出以后，取出用自來(lái)水沖凈表層，用手術(shù)刀去除須根、葉和鱗莖上部的鱗片，只保留鱗莖盤。清理好的鱗莖盤用自來(lái)水沖洗干凈，并用濾紙吸干水分置于超凈工作臺(tái)上備用。在接種前先用75%的酒精浸泡鱗莖盤30～60秒，用無(wú)菌水沖洗一次，然后用0.1%的氯化汞溶液消毒15分鐘，最后用無(wú)菌水浸泡3～5次、每次5～10分鐘，并用無(wú)菌鑷子不斷攪動(dòng)，去除殘留在外植體上的氯化汞。將消毒好的材料放在無(wú)菌濾紙上吸干水分，切成5mm×5mm×5mm大小的外植體塊接種于已配制好的培養(yǎng)基中，一瓶培養(yǎng)基只接種一個(gè)切塊。接種好的外植體放置在培養(yǎng)室中培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度為20～25℃，每天光照時(shí)間為10～20小時(shí)，光照強(qiáng)度為1000—20001x。愈傷組織塊不能切得太小，否則分化會(huì)太慢；若愈傷組織塊太大很快就會(huì)長(zhǎng)滿瓶，不易取出，故其大小要適宜。 苗木網(wǎng),www.cqhuayin.com

    (3)不定芽的生根培養(yǎng) 苗木網(wǎng),999miaomu.com

    將繼代培養(yǎng)好的小芽切下分別接種于的培養(yǎng)基中。在操作過(guò)程中一定要將小芽基部的愈傷組織切除干凈，否則根會(huì)長(zhǎng)在愈傷組織上，影響其成活率。

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    (4)生根小苗的移栽 苗木網(wǎng),999miaomu.com

    試管苗不經(jīng)過(guò)生根可以直接出瓶。小苗生根后先打開(kāi)瓶口，讓小苗在室外適應(yīng)外界環(huán)境，2～3天后取出瓶苗，洗凈瓶苗基部的瓊脂，最后將小苗移栽至壤土∶腐葉土∶河沙為5∶3∶1(體積比)基質(zhì)中，成活率可達(dá)98%。在洗苗過(guò)程中一定要洗凈瓊脂，防止滋生微生物。 苗木網(wǎng),999miaomu.com

    (5)朱頂紅取材最好在生長(zhǎng)旺盛的春季，以確保其具備較強(qiáng)的分生能力。 中國(guó)苗木網(wǎng),www.cqhuayin.com

    在培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)朱頂紅的鱗片與鱗片之間的夾層有凸起出現(xiàn)，上部產(chǎn)生數(shù)個(gè)小仔球，小仔球上部逐漸變綠，將獨(dú)立的小仔球轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基中數(shù)日后形成小球叢。朱頂紅比較容易感染病菌，最常見(jiàn)的是紅斑病。取材時(shí)須取無(wú)病蟲(chóng)害的部位，或引進(jìn)種子在試管中播種，生根發(fā)芽后再進(jìn)行培養(yǎng)。若材料豐富，可在解剖顯微鏡下剝?nèi)∏o尖的途徑來(lái)獲得無(wú)病毒的材料。但此方法會(huì)使生長(zhǎng)點(diǎn)長(zhǎng)得很慢，周期很長(zhǎng)，一般從誘導(dǎo)至生根培養(yǎng)需90～120天。據(jù)本試驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn)，組培苗具有一定的馴化現(xiàn)象，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的繼代培養(yǎng)后，只要加入極少量激素也可以達(dá)到一開(kāi)始培養(yǎng)的效果；在煉苗過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)球根花卉一般比較容易成活，試驗(yàn)認(rèn)為，朱頂紅不經(jīng)過(guò)生根可以直接移入基質(zhì)中，成活率可達(dá)98%；朱頂紅在組織培養(yǎng)中，芽增殖率高，球小，須進(jìn)行壯苗培養(yǎng)以后生根，但在增殖培養(yǎng)基MS+lmg/LKT+0.1mg/LNAA中產(chǎn)生不定根，無(wú)需進(jìn)行生根培養(yǎng)；朱頂紅的生長(zhǎng)需要充足的光照，光照適宜，葉大、厚、肥且具有光澤，花大且艷；光照不足則抽出的花葶開(kāi)不出花，由頂部花苞逐漸向下枯萎，葉子細(xì)且失去光澤、失綠；朱頂紅具有很強(qiáng)的向光性。在朱頂紅組培中，要特別注意試驗(yàn)的激素配比，在MS+1mg/LKT+0.1mg/LNAA的培養(yǎng)基中既生根又長(zhǎng)芽，愈傷組織很少；只加糠基腺嘌呤不長(zhǎng)根。結(jié)果認(rèn)為分裂素與生長(zhǎng)素比值小，有利于生根，相反則分化形成芽或愈傷組織。朱頂紅組培苗煉苗在帶有防蟲(chóng)網(wǎng)的玻璃溫室內(nèi)進(jìn)行，基質(zhì)要進(jìn)行消毒，先用甲醛密封熏蒸7天，再打開(kāi)讓甲醛徹底揮發(fā)，裝入營(yíng)養(yǎng)缽內(nèi)待用。 中國(guó)苗木網(wǎng),www.cqhuayin.com