用組織培養(yǎng)法繁殖葡萄，可達(dá)到優(yōu)良葡萄快速育苗的目的，以滿足生產(chǎn)需要。同時也是工廠化育苗和脫毒苗木快速繁殖的重要手段，并能常年進(jìn)行，縮短了苗木繁殖周期，加快新品種的推廣應(yīng)用。

    一、試管苗的初代培養(yǎng)

    葡萄組織培養(yǎng)初代培養(yǎng)，其繁殖材料多取自大田，常帶有大量細(xì)菌和霉菌，必須進(jìn)行消毒方可獲得無菌材料。材料采集在前三天無雨的晴天上午進(jìn)行，取帶腋芽的葡萄半木質(zhì)嫩莖，剪取后立即拿入室內(nèi)，先用自來水反復(fù)沖洗，除去病蟲枝、殘傷枝，減除大葉片，裝入廣口瓶進(jìn)行消毒。用無菌操作技術(shù)，倒入無菌水浸泡和沖洗，倒去無菌水，加入0．1％升汞（內(nèi)加2％的95％酒精）浸沒材料，并劇烈搖動6分鐘～9分鐘，剪去受傷端面，剪成單芽莖段，接入培養(yǎng)基中。每瓶插一段，正插入內(nèi)。標(biāo)號后放到培養(yǎng)室培養(yǎng)，一周后檢查，如未污染，基本上不會再污染。通過對美人指、早紅提等品種的生產(chǎn)，取得了90％以上無污染成苗率。

    二、試管苗的繼代繁殖

    對初代培養(yǎng)合格或引進(jìn)的試管苗，一般采用MS、B5、GS等培養(yǎng)基，具體做法如下：

    1．穿好工作服，戴上工作帽，用潔凈的水洗手，再用75％的酒精棉球擦手消毒。 999中國苗木網(wǎng),999miaomu.com

    2．取無菌原種苗瓶放于超凈臺，用75％酒精棉球仔細(xì)擦試包頭紙及苗瓶外體，并解開包頭紙捆扎線繩。

    3．將彎剪刀、槍狀鑷子浸入75％酒精中，用時取出在火焰上燒15秒～30秒，涼冷備用。

    4．將無菌原種苗瓶的包頭紙連同棉塞一同拔下，放在超凈臺一旁，瓶口在火焰上燒5秒～10秒，用冷卻的剪刀將瓶內(nèi)小苗剪成單芽莖段，下端稍長，上端較短，但剪口距芽至少0．5厘米以上。母株基部要留一芽，使其再發(fā)。剪下的單芽莖段，用無菌鑷子逐個夾出，放入新的培養(yǎng)基瓶內(nèi)，并使葉子和芽露出培養(yǎng)基上方。150毫升三角瓶插5個左右莖段，插完后將瓶口在火焰上轉(zhuǎn)動燒一遍，旋好棉塞和包上包頭紙，用繩扎好，注明名稱和時間等。如此反復(fù)的接好所有苗子，并放到培養(yǎng)室。一般每月轉(zhuǎn)接增殖3次。

    三、試管苗的培養(yǎng)

    將接種后的培養(yǎng)苗瓶，放在培養(yǎng)室的培養(yǎng)架上，培養(yǎng)室晝夜溫度保持在22℃～28℃，新轉(zhuǎn)接的苗瓶應(yīng)放在培養(yǎng)架上層，上層溫度略高易于生根。培養(yǎng)室的濕度以70％為宜，光照2000～3000勒克斯的日光燈。

    四、移栽

    時期多在冬季或春季進(jìn)行。 中國苗木網(wǎng),999miaomu.com

    1．光培煉苗。培養(yǎng)室培養(yǎng)的試管苗生長達(dá)瓶口，有3枚～4枚正常葉片時，根系生長良好，連同培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)入溫室或大棚內(nèi)，逐步去掉瓶塞，放在干凈的溫室中，在2萬～4萬勒克斯的自然光下煉苗5天～7天，當(dāng)瓶口長出油亮的葉片，幼莖變淡紅色時即可出瓶。

    2．沙培煉苗。最好備有下鋪電熱線并能調(diào)節(jié)溫度的沙床，使床溫維持在25℃左右。以0．6厘米間距布置電熱線，其上鋪墊2厘米的土，壓平，再鋪8厘米～10厘米的干凈細(xì)河沙，濕度以12％左右，即手捏成團(tuán)落地能散。

    清晨或傍晚，將培養(yǎng)瓶內(nèi)的幼苗輕輕倒出，洗掉根上附著的培養(yǎng)基，栽入沙床，3厘米～4厘米株距，8厘米～10厘米行距，每平方米大約栽400苗～500苗。栽入沙床后，蓋好小拱棚，最初3天，棚內(nèi)溫度保持在25℃左右，最高不超過30℃，最低不低于20℃。相對濕度保持在80％～95％；光照0．7萬～1萬勒克斯。6天～7天后，拆除臨時小拱棚。

    3．溫室營養(yǎng)袋煉苗。經(jīng)沙培后的合格苗，小心挖出，在空氣濕度不低于70％，溫度20℃～25℃，無直射光下，栽入肥土：沙：腐熟有機(jī)肥為1：1：0．2的營養(yǎng)缽中，最初幾天對溫、光、濕的管理同沙培苗相同。 999中國苗木網(wǎng),999miaomu.com

    4．大田苗圃移栽。選土質(zhì)疏松肥沃，排灌水方便，距溫室較近且日照良好的地塊作苗圃，將營養(yǎng)袋苗移栽即可。小苗有3個月的生長期，并及時打掉副梢，促進(jìn)枝芽老化成熟，達(dá)到合格優(yōu)質(zhì)苗。 中國苗木網(wǎng),www.cqhuayin.com

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