花葉絡石組織培養(yǎng)快繁技術 |
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來源: 作者: 發(fā)布時間:2013-07-23 17:15 |
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花葉絡石 999中國苗木網(wǎng),www.cqhuayin.com 1、花葉絡石簡介 苗木網(wǎng),www.cqhuayin.com 1.4繁殖花葉絡石引種成活率達65%,經(jīng)試驗繁殖發(fā)現(xiàn),花葉絡石可以在一年中任何季節(jié)扦插繁殖,春季與秋季的生根率均可達80%以上,夏季扦插對于部分生長太嫩的枝條易腐爛,但達到半木質(zhì)化的枝條均可生根成活。但是通過營養(yǎng)繁殖的方式經(jīng)多代繁育后,容易出現(xiàn)葉色退化,種苗顏色不穩(wěn)定;通過組織培養(yǎng)法繁殖花葉絡石技術,組培過程中即可出現(xiàn)花葉,遺傳性狀穩(wěn)定。 2材料類別當年生新梢。 3培養(yǎng)條件基本培養(yǎng)基為HS。(1)誘導休眠芽萌動培養(yǎng)基MS+NAA0.05mg/L-1(單位下同)+6-BA2.0;(2)芽增殖培養(yǎng)基:MS+IAA0.2+6-BA1.5;(3):隆苗培養(yǎng)基:MS+NAA0.5+6-BA0.5;(4)生根培養(yǎng)基:l/2MS+NAA0.5+IBA0.2。以上培養(yǎng)基均附加20g/L-1蔗糖、7g兒-1瓊脂,PH6.0-6.2;光照度為2000~2500lx,每天光照14h;培養(yǎng)溫度白天為25~30℃,夜間為15—20℃。 4生長與分化情況 4.1無菌材料的獲得選取一年生幼苗生長健;仕無病蟲害的母株,切取當年萌發(fā)之春梢先端,去除葉片,保留葉柄,將枝條截成2—3cm的小段。消毒時先用10%洗衣粉溶液浸泡15min,然后用流水;中洗30min。在無菌條件下用75%乙醇溶液浸泡殺菌30S,用0.1%的升汞溶液加吐溫—20殺菌3、5、10、15min。0.1%升汞溶液滅菌效果隨殺菌時間延長而提高,殺菌時間少于10min則無菌苗獲得率小于13.5%,殺菌15min”無菌苗獲得率為23.7%,外植體死亡率達33.3%。隨著殺菌時間的延長升汞對植物材料的毒害作用加劇,以0.1%升汞溶液殺菌時間10—15min為宜。用無菌水;中洗3—5遍后,接種到MS固體培養(yǎng)基上。 中國苗木網(wǎng),999miaomu.com 4.2芽的誘導將接種后20d的無菌苗轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)基(1)上,5—7d莖尖開始萌動,10d腋芽萌動,芽逐漸長大,繼續(xù)培養(yǎng)20d,莖段上所有腋芽均萌發(fā)成側(cè)枝。側(cè)枝生長正常,葉片深綠色,莖基部愈傷組織較少,黃綠色。 4.3試管苗的增殖將試管苗側(cè)枝分割成2—3芽為一段,接種于培養(yǎng)基(2)上。10d后莖段葉芽萌動,30d長成大量側(cè)枝,并有大量雙生枝和三生枝產(chǎn)生。接種莖段形成具有5—8側(cè)枝的叢生苗,平均增殖5.8倍。試管苗節(jié)間明顯伸長,幼嫩葉片莖桿均呈淡紅色,葉片大,莖桿較粗,組織不充實,莖基部愈傷組織大。以后每30d繼代1次,經(jīng)3—4次繼代試管苗出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象。 4.4壯苗培養(yǎng)將經(jīng)增殖培養(yǎng)的試管苗每繼代3—4次后轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)基(3)上。40d后形成大量側(cè)枝,平均每莖段4—6側(cè)枝,側(cè)枝平均長1.8cm,平均增殖3.1倍。基本無雙生枝或三生枝。側(cè)枝生長健;D,組織充實,葉色深綠,基部愈傷組織小,黃綠色,無玻璃化現(xiàn)象。 4.5根的誘導將生長健壯、長度大于1.2cm的側(cè)枝分割,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)基(4)上。提高光照度至2500—3000lx,延長光照時間至每天16h。培養(yǎng)15d后開始有根原基形成,根原基形成后即可煉苗。20—25d調(diào)查生根情況,生根率73%,每苗平均生根l—2條。 苗木網(wǎng),www.cqhuayin.com 4.6煉苗移栽將生根試管苗帶瓶移人栽培溫室,培養(yǎng)1周。當根長0.5—1omb寸,打開瓶蓋煉苗3—5d,將生根苗取出,洗凈根部培養(yǎng)基,栽植于育苗穴盤中。以黑泥碳為基質(zhì),溫度控制在20—25℃之間,濕度為85%—95%左右,20d即可成活,成活率達73%以上。 999苗木網(wǎng),999miaomu.com 999中國苗木網(wǎng),999miaomu.com
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