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百合是世界上著名的切花品種之一,靠常規的小鱗莖分株方法繁殖,繁殖系數較低,1株百合每年只能得到1～3個小鱗莖[1]。有些種類可用鱗片扦插繁殖,但往往容易腐爛。另外,百合長期靠營養繁殖,容易感染病毒病,而影響百合品質[2]。組織培養快速繁殖技術,能夠迅速去除病毒和更新品種,具有較高的經濟價值和開發潛力,因而得到廣泛的應用。近年來,很多花卉研究者進行了百合的組織培養繁殖研究,所選的外植體有珠芽、幼莖段、葉片、鱗片等[36],主要側重于不同外植體對百合成苗和脫毒效果的研究,而關于利用組培苗葉片基部進行快速繁殖和結鱗莖的研究,報道較少[7]。本試驗以組培苗葉片基部為材料,對影響百合成苗和結鱗莖的兩類主要激素進行了系統研究,省去了對外植體消毒處理的過程,減少了污染機率,為將來大規模生產百合小苗和鱗球莖在理論和實踐上提供參考依據。
1材料與方法
1.1材料
采用的百合品種為麝香百合(ＬｉｌｉｕｍｌｏｎｇｉｆｌｏｒｎｍＴｈｕｍｂ),英文名字為Ｅａｓｔｅｒｌｉｌｙ。
1.2方法
取百合鱗片經消毒后,接種于ＭＳ培養基上,誘導叢芽體,叢芽體繼代擴增后,剝取叢芽葉片基部進行處理。 苗木網,www.cqhuayin.com
1.2.16ＢＡ和ＮＡＡ處理以ＭＳ為基本培養基,設計系列濃度的6ＢＡ和ＮＡＡ處理組合,6ＢＡ(ｍｇ/Ｌ)為:0,05,10,20;ＮＡＡ(ｍｇ/Ｌ)為:0,01,02,04。共16個處理組合,代號分別為:Ｄ11、Ｄ12至Ｄ44。每個處理組合接種3瓶,每瓶接10個葉片基部,長度約為1ｃｍ。2個月后觀察統計,生根率以長根植株占成苗植株的百分數進行統計;結鱗莖率以結鱗莖植株占成苗植株的百分數進行統計。
1.2.2培養條件百合適宜的培養溫度為22～25℃,光照強度為1000～1500ｌｘ,每日光照10～16ｈ,相對濕度約為70%。
2結果與分析
不同濃度激素組合對葉片成苗和結鱗莖的處理效果見表1。
21成苗率
成苗率是指所出的苗數占接種的葉基部總數的百分數。隨著6ＢＡ濃度的加大,成苗率呈降低趨勢。從4個濃度的6ＢＡ看,不加6ＢＡ的處理(Ｄ11、Ｄ12、Ｄ13、Ｄ14)成苗率最高,平均值為7625%,說明6ＢＡ對成苗有抑制作用。而適量的ＮＡＡ對成苗有一定的促進作用,在這16個處理中,以Ｄ12處理成苗率最高。
22增殖系數
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組培百合的基本目標之一是在短時間內大量繁殖小苗和球莖,所以提高增殖系數,可在短時間內獲得更多的小苗或球莖。綜合這16個處理,以Ｄ22和Ｄ43處理增殖系數最高,分別為:17和20;其次為Ｄ12、Ｄ24和Ｄ34,均為16。
23結鱗莖率和鱗莖直徑
結鱗莖率以不加6ＢＡ的為最高,隨6ＢＡ濃度加大,結鱗莖率下降;鱗莖直徑也有類似的結果。表明6ＢＡ對結鱗莖率和鱗莖直徑有抑制作用。
24株高和生根率
株高隨著6ＢＡ濃度的加大而降低,從17ｃｍ降到06ｃｍ;生根率以不加6ＢＡ的為最高,平均值為905%,加大6ＢＡ濃度明顯抑制百合生根。這說明ＮＡＡ對株高和生根的促進作用,隨著6ＢＡ濃度加大被抵消一部分或完全被抑制。
25小苗的栽培和處理
對于苗高3～4ｃｍ的已生根帶有鱗莖的小苗,可打開瓶口煉苗3～5ｄ,然后移入沙∶土(1∶1)的基質中,保持溫度15～25℃,濕度70%以上,50%自然光照,可得到較高成活率。所用沙土最好是經過滅菌的,如果用未滅菌的沙土,小苗莖部容易受細菌和霉菌的侵染而腐爛,影響成活率;用高溫滅菌的沙土混合物,小苗不容易得病,長勢較未滅菌的健壯,且成活率較高。對處于芽苗階段的小苗,可繼代至ＭＳ+ＮＡＡ003ｍｇ/Ｌ的培養基中,促進其生長;對沒有生根的小苗可繼代至1/2ＭＳ+活性炭5%的生根培養基中,進行生根培養,然后再進行移栽。 苗木網,www.cqhuayin.com
3小結與討論
綜合以上試驗結果得出:6ＢＡ主要有提高增殖系數的作用,但抑制結鱗莖和減小鱗莖直徑,同時抑制植株長高和生根,這與趙祥云[5]的研究結果相似。ＮＡＡ有促進成苗、植株長高和生根的作用,但過多ＮＡＡ會使氣生根增多,不利于小苗生長。從成苗和結鱗莖率角度看,本試驗最優組合為Ｄ12;從提高增殖系數角度看,以Ｄ43最好;如果把成苗和提高增值系數結合起來,則Ｄ22最優。所以適當地調整6ＢＡ和ＮＡＡ的濃度比,才能得到理想的結果。本試驗對影響百合成苗和增殖的2種激素進行了初步研究,從中選出了利于成苗和增殖的最優組合。王愛勤[7]等認為糖的濃度對試管結鱗莖有影響,關于糖濃度及如何調控和增加其他一些激素使百合在試管內快速結鱗莖和增大鱗莖直徑等技術,有待于進一步研究。 999苗木網,www.cqhuayin.com
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