春蘭,自古以來,以其優雅之香、優美之葉和分布廣泛,一直倍受人們推崇,并成為東洋蘭系的代表種,F代,又因藝葉和奇花的發現,引起了人們極大的興趣。但是,和其它東洋蘭一樣,因其自然分蘗繁殖速度極為緩慢,使得許多蘭花愛好者難以擁有自己所喜愛的品種。
現在,這個問題通過組織培養已能得到解決。在春蘭為代表的東洋蘭組培中,一般要經過這樣幾個階段:1.地下莖的形成。2.地下莖的增殖。3.從地下莖形成具有葉。根和假鱗莖的完整組培苗。因此,其總的培養過程較之卡特蘭等西洋蘭有很大的差異,而且培養的時間要長得多。
下面就介紹組織培養的基本過程。
(一)組織培養的方法
1.材料。
采用莖頂培養的材料一般選取健壯無病株的一年生植株,在腋芽膨大的三、四月間采取。
2.殺菌和采芽。
將假鱗莖在葉的基部2-知cn處切去根、剝去時。在自來水中充分沖洗后,在5%的重氯酸鈉或亞酸鈣中消毒10分鐘,移人無菌操作臺內,用滅菌水沖洗三次,然后用濾紙吸去水分,置人表面皿中。 苗木網,999miaomu.com
采取腋芽莖頂時,將假鱗莖以腋芽相對一倒,用2枚大頭針固定在橡膠栓上,后在實驗顯微鏡下,將腋芽鱗片、葉片依次用解剖刀剝去,切取腋芽項端1-2mm長度的組織。腋芽切取一般以假鱗莖下部腋芽為佳。
運用尚未展葉的假鱗莖,切取其莖頂組織,其操作方法與切取腋芽組織類似,只是在橡膠栓上固定的角度稍有不同。用些材料培養,其地下莖的形成要較腋芽為材料的要低。
3.培養基
一般使用添加NAAIPPM、KTO.lppm的Ms培養基,但因春蘭不同品種對培養基質反應不同,最適宜的培養基配方仍須在實踐中探索。另外,春蘭培養一般使用含有瓊脂的固體培養基為宜。
4.著床
切取的莖頂應立即將其切斷面與培養表面密著,而且用塞子將試管密封。因地下莖形成時間較長,因試管密封環節必須高度重視。
5.培養條件。
根據試驗,在25℃條件下,黑暗狀態比照明狀態下地下莖的形成要高,且初期生長快。一般在莖頂著床3O—45日后能用肉眼觀察到地下莖,但到完全形成卻需3個月左右時間。 999中國苗木網,999miaomu.com
6.地下莖的增殖和繼代。
在地一下莖長至約1cm長度時,應將其移植到微通氣寒栓封日的增殖培養基中,在500-1000lux光條件下培養。為利于增殖,培養容器一段采用5O0ml的三角燒瓶,內注人150-200nl的培養基。培養基可選用添加NAAO.SPPmr的京都培養基。
7.假鱗莖的形成
從地下莖先端到假鱗莖形成約需一年時間,培養基一般采用添加1PPm的NAA、2PPm的BA的Ms培養基。至含3一5片葉,1-3條根的假鱗整形成后可切離移栽。
8.馴化。
從試管中移出的幼苗可移植到水苔、云母或其它春蘭用土中。馴化一般采用兩個階段,第一階段為開始的l-2個月,在馴化室中進行,其條件類似于培養室;第二階段則是近于一般種植的蘭室,但要求做到弱光、多濕、適溫條件。
二、藝葉的發現。
根據部分實驗室培養的結果,不同的藝葉品種經過組織后具有明顯的差異,對于藝葉的代表種類覆輪、中透縞、虎斑來說,各具有這樣的特點。
1.覆輪:在組織過程中能形成兩種地下莖。綠色的地下莖能形成與親本完全一樣的植株;黃白色的地下莖則不能形成正常的植株,也難以產生正常的地下莖。
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2.中透縞。不能形成含有親本色藝的藝葉,組培苗全部是正常綠葉的植株。因此,中透縞在目前無法通過組培來繁殖。
3.虎斑。在培養過程中斑藝往往難以表現,這主要是光線不足的緣故。在植株移栽后,只要予以適當的條件,新萌發的假鱗莖能表現出與親本完全一致的植株,其成功率約為3O%。
(記者 佚名) 999苗木網,999miaomu.com
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