驅蚊香草是天竺葵科天竺葵屬多年生常綠草本轉基因植物。它不僅能天然揮發(fā)出香茅醛、香茅醇等物質有效驅除蚊蟲,還能散發(fā)出檸檬香氣凈化空氣,其主莖柔軟,可以塑造各種盆景供觀賞。驅蚊香草能正常開花,但不能自然繁育。在實踐中證明扦插成活率低,并且其功能逐代衰退。采用莖尖離體培養(yǎng)技術能有效地保持驅蚊香草種性穩(wěn)定并能快速增加幼苗數(shù)量,具有成本低、時間短、繁殖系數(shù)高等優(yōu)點。
(一)材料和培養(yǎng)條件
1.材料:驅蚊香草莖尖。 2.培養(yǎng)條件:MS為基本培養(yǎng)基。(1)起始和增殖培養(yǎng)基:MS+硝酸銨800mg/L(單位下同)+磷酸二氫鈉,H2O150+赤霉素1+KT8+IAA1;(2)生根培養(yǎng)基:1/2MS+Fe鹽5ml+NAA0.2;培養(yǎng)基均加蔗糖3%、瓊脂0.6%,pH5.6,121℃、0.11MPa下滅菌25分鐘。培養(yǎng)溫度25(±1)℃,光照12小時/日,光照度2000Lx。
(二)生長與分化情況
1.無菌材料的獲得:選取健壯的驅蚊香草幼苗,去掉莖尖,移植到經(jīng)消毒的盆土中室內培養(yǎng)。15~20天后,取腋芽上長約1.0cm的新生莖尖為外植體。去掉展開幼葉,流水沖洗1~2小時,置超凈臺上用70%酒精處理10~15秒,無菌水沖洗2~3次,0.1%高汞鹽消毒10分鐘,無菌水再次沖洗4~5次。無菌條件下用無菌濾紙將材料表面水分吸干,在雙筒解剖鏡下剝取莖尖,將具有2個最幼小葉原基的莖尖接種于起始培養(yǎng)基上。若出現(xiàn)褐化及時轉接,轉接2~3次即不再有褐化。接種5~7天后莖尖萌發(fā)生長,15天左右可長到高0.5~2cm、帶1~2片葉的叢生芽,25天后繼代轉移進行腋芽增殖。 999中國苗木網(wǎng),www.cqhuayin.com 2.腋芽增殖:將上述叢生芽剪切成帶1~2個芽的芽塊,去掉基部愈傷組織后,接種到增殖培養(yǎng)基上。培養(yǎng)30天左右,每個芽塊的腋芽又萌發(fā)成長3cm左右,具4~6片葉的叢生芽。這樣重復繼代增殖,每個初始培養(yǎng)的叢生芽繁殖15代左右,即可得到大量組培苗。 3.生根與煉苗:無菌條件下切取叢芽中高3cm左右的壯芽轉接至生根培養(yǎng)基上,培養(yǎng)20天后不定根開始大量形成,每株平均生根8條以上,生根率達95%以上。為讓試管苗逐漸由異養(yǎng)生長向自養(yǎng)生長過渡,打開瓶口倒入20℃溫水至1.5cm左右深保濕防污,煉苗4~6天后小心取出,洗凈根部瓊脂進行移栽。 4.移栽:移栽前將草炭土和珍珠巖按2∶1混合并進行滅菌處理,選擇氣候溫和的時間移栽入混合基質。移栽時用生根粉ABT150mg/L+細土100g/L的溶液浸漬20分鐘。緩苗后定期追施1/2MS大量元素的水溶液,注意溫度、濕度、光照及水肥管理,移栽成活率可達90%以上。(記者 佚名) 中國苗木網(wǎng),www.cqhuayin.com
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